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作者很懒没有写任何内容
商品凝胶，为干燥的颗粒，使用前需要用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，
再用洗脱液进行充分洗涤平衡，使凝胶装填紧第 1 页
阶段质量检测(五) DNA和蛋白质技术(B卷 能力素养提升)(满分：100分 时间：40分钟)一、选择题(每小题4分，共48分)1．蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是( )A．蒸馏水 B．NaCl溶液C．NaOH溶液D．盐酸解析：选B 染色质中的主要成分是DNA和蛋白质，可以利用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分开。DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度最高，而蛋白质则不能溶解在2 mol/L NaCl溶液中，通过过滤除去不能溶解的杂质蛋白。由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的是一样的。2．下列关于蛋白质性质的叙述中，不会影响到蛋白质在凝胶电泳中运动速度的是()A．蛋白质分子的大小B．蛋白质分子的密度C．蛋白质分子的形状D．蛋白质分子所带电荷量解析：选B 电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。3．下列有关PCR的描述错误的是( )A．是一种酶促反应B．引物决定了扩增的特异性C．PCR反应中的目的片段一般以2n的方式积累(假设扩增效率为100%)D．扩增对象是氨基酸序列解析：选D PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。4．下列关于血红蛋白的提取和分离操作的叙述，错误的是( )A．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装B．凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液C．为加快凝胶膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾，通常只需1～2 hD．在血红蛋白提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理，是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能解析：选B 由于装填凝胶柱时用到的是
也可在沸水浴中加热膨胀，既可节约时间，也可除去凝胶中的微生物，排出胶粒内的
空气。5．DNA具
有半保留复制的特性，但是在DNA分子复制的过程中需要一些引物，其主要原
因是( )A．可加快DNA的复制速度B．引物可与DNA母链
通过碱基互补配对结合C．引物的5′端有
助于DNA聚合酶延伸DNA链D．DNA聚合酶只能从3′端
延伸DNA链解析：选D DNA的两
条链是反向平行的，DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端
延伸DNA链，因此，DNA的复制需要引物。当引物与DNA母链通过
碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，故DNA的合成方
向总是从子链的5′端向3′端延伸。6．在蛋白质和DNA的
混合液中，要想得到较纯的DNA，可采用的方法有( )①向混
合液中加入足量的蒸馏水 ②向混合液中加入DNA水解酶 ③向混合液中加入
冷的95%的酒精 ④向混合液中加入蛋白酶A．①② B．③④C．①③D．②④解析：选B DNA分子在
冷的酒精中可析出，据此可将DNA和蛋白质分离；而蛋白酶则能将蛋白质水解成可溶性的
多肽，从而将蛋白质与DNA分离。7．PCR技术是在
遗传实验室中常见的一种DNA片段进行体外扩增的方法，利用它能快速
得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR实验中使用的微量离心管、枪头
、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )A．反复洗
涤 B．不被外源DNA污染C．高
压灭菌D．在－20 ℃保存解析：选C 通过对PCR实
验中所用仪器和试剂进行高压灭菌，可以避免外源DNA等因
素的污染。8．
某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是 ( )A．加入洗
涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B．用蛋白酶
纯化过滤后的研磨液中的DNA C．加入
酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D．加
二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 解析：选A 加入洗
涤剂后研磨动作要轻缓、柔和，否则容易产生许多泡沫，不利于后
续步骤的操作，A项错误；蛋白酶能够分解蛋白质，因此能起到纯化DNA的目的，B项正确；
加入酒精后用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免引起DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成
絮状沉淀，C项正确；DNA可与二苯胺试剂在沸水浴条件下呈蓝色，D项正确
。9．将
经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后，离心管中第 2 页
密，
，从上到下的顺序依次是( )A．血红蛋白、
甲苯层、脂类物质层、沉淀层B．
甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂类物质层C．
脂类物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D．
甲苯层、脂类物质层、血红蛋白、沉淀层解析：选D
混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：
第1层为无色透明的甲苯层；第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第3层
是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液；第4层是其他杂质的暗红色沉淀物，主要是红
细胞破碎物沉淀。10．PCR又称多
聚酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外
很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件
的一组是( )①稳定的缓冲液
环境 ②DNA模板 ③合成引物 ④四种脱氧核苷酸 ⑤DNA聚合酶⑥DNA解
旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧C．③④⑤⑥⑧D．①②③④⑤⑧解析：选D 体外DNA扩增(PCR技术)是模
拟生物细胞内DNA复制的条件，只是无
需解旋酶(可热变性)，也不需要基因工程的工具酶(限制性核酸内切酶)，但需要耐高温的DNA聚合酶。11．
某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的
肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测
工作，其中正确的操作步骤及顺序是( )①降低
温度，检测处理后的杂合DNA双链②通过PCR技术扩增
巨型动物和大象的DNA③把巨型
动物的DNA导入大象的细胞中④在一定温度
条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A．②④①B．②④③① C．③④① D．②④③解析：选A PCR技术是分子生物
学发展史上的一个里程碑，它大大简化了基因克隆
的步骤，已广泛应用于生物学研究的各个领域。PCR反应通过变性、复性、延伸三个循环步骤
，使目标DNA片段呈指数扩增。因此，PCR系统是一个极其灵敏的信号放
大系统，能将极微弱甚至是单拷贝的基因信号检测出来。通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA，然后利用DNA分子在高温时解
螺旋的特点，将巨型动物和大象的DNA水浴共热，
再降低温度，检测处理后的杂合DNA双链。12．PCR技术是一
项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列
说法错误的是( )A．
甲过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用第 3 页
的溶液分为4层
丙过程用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加C．
如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃～55 ℃～72 ℃”温度
循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%D．PCR中由
碱基错配引起的变异属于基因突变解析：选B
丙过程用到的酶是Taq DNA聚合酶，其特点是耐高温。二
、非选择题(共52分)13．(20分)CTAB法是一种从高
等真核生物细胞中制备基因组DNA(总DNA)的技术。CTAB能
跟核酸形成复合物，在高盐溶液(＞0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在，
当降低溶液中盐的浓度(＜0.3 mol/L的NaCl溶液)时，CTAB－核酸的复合物就会
因溶解度降低而沉淀，再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而
沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下：①在50 mL离
心管中加入20 mL的CTAB抽提缓冲液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB)，于65 ℃水浴中
预热；②将20 g新鲜
的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离
心管中，于65 ℃水浴中保温30 min；③取出离
心管，冷却至室温，加入20 mL的氯仿，轻轻混匀20 min；④在
室温下以12 000 r/min的转速离心10～20 min；⑤将上
清液移入另一个离心管中，加入2/3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅
动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB－核酸的复合物沉淀；⑥将
沉淀移入另一个离心管中，加入70%酒精洗涤，重复洗涤1～2次；⑦吹
干酒精后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离
并在核酸紫外检测仪上观察。请回答
下列问题：(1)植
物基因组DNA(总DNA)的提取通常采用机械研磨的方法。常温下研磨时，植物
细胞匀浆中含有的多种酶会对DNA的提取产生不利影响。用液氮速冻，材料在研磨时
易破碎，同时还能__________________________________________________________________________________________________________________________。(2)实
验步骤③④的目的是________________________________________________________________________。(3)实
验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是______________________________________________________________________________________________________________
再用洗脱液进行充分洗涤平衡，使凝胶装填紧第 1 页
阶段质量检测(五) DNA和蛋白质技术(B卷 能力素养提升)(满分：100分 时间：40分钟)一、选择题(每小题4分，共48分)1．蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是( )A．蒸馏水 B．NaCl溶液C．NaOH溶液D．盐酸解析：选B 染色质中的主要成分是DNA和蛋白质，可以利用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分开。DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度最高，而蛋白质则不能溶解在2 mol/L NaCl溶液中，通过过滤除去不能溶解的杂质蛋白。由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的是一样的。2．下列关于蛋白质性质的叙述中，不会影响到蛋白质在凝胶电泳中运动速度的是()A．蛋白质分子的大小B．蛋白质分子的密度C．蛋白质分子的形状D．蛋白质分子所带电荷量解析：选B 电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。3．下列有关PCR的描述错误的是( )A．是一种酶促反应B．引物决定了扩增的特异性C．PCR反应中的目的片段一般以2n的方式积累(假设扩增效率为100%)D．扩增对象是氨基酸序列解析：选D PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。4．下列关于血红蛋白的提取和分离操作的叙述，错误的是( )A．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装B．凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液C．为加快凝胶膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾，通常只需1～2 hD．在血红蛋白提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理，是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能解析：选B 由于装填凝胶柱时用到的是
也可在沸水浴中加热膨胀，既可节约时间，也可除去凝胶中的微生物，排出胶粒内的
空气。5．DNA具
有半保留复制的特性，但是在DNA分子复制的过程中需要一些引物，其主要原
因是( )A．可加快DNA的复制速度B．引物可与DNA母链
通过碱基互补配对结合C．引物的5′端有
助于DNA聚合酶延伸DNA链D．DNA聚合酶只能从3′端
延伸DNA链解析：选D DNA的两
条链是反向平行的，DNA聚合酶不能从5′端开始合成DNA，而只能从3′端
延伸DNA链，因此，DNA的复制需要引物。当引物与DNA母链通过
碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，故DNA的合成方
向总是从子链的5′端向3′端延伸。6．在蛋白质和DNA的
混合液中，要想得到较纯的DNA，可采用的方法有( )①向混
合液中加入足量的蒸馏水 ②向混合液中加入DNA水解酶 ③向混合液中加入
冷的95%的酒精 ④向混合液中加入蛋白酶A．①② B．③④C．①③D．②④解析：选B DNA分子在
冷的酒精中可析出，据此可将DNA和蛋白质分离；而蛋白酶则能将蛋白质水解成可溶性的
多肽，从而将蛋白质与DNA分离。7．PCR技术是在
遗传实验室中常见的一种DNA片段进行体外扩增的方法，利用它能快速
得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR实验中使用的微量离心管、枪头
、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )A．反复洗
涤 B．不被外源DNA污染C．高
压灭菌D．在－20 ℃保存解析：选C 通过对PCR实
验中所用仪器和试剂进行高压灭菌，可以避免外源DNA等因
素的污染。8．
某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是 ( )A．加入洗
涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B．用蛋白酶
纯化过滤后的研磨液中的DNA C．加入
酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D．加
二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 解析：选A 加入洗
涤剂后研磨动作要轻缓、柔和，否则容易产生许多泡沫，不利于后
续步骤的操作，A项错误；蛋白酶能够分解蛋白质，因此能起到纯化DNA的目的，B项正确；
加入酒精后用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免引起DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成
絮状沉淀，C项正确；DNA可与二苯胺试剂在沸水浴条件下呈蓝色，D项正确
。9．将
经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后，离心管中第 2 页
密，
，从上到下的顺序依次是( )A．血红蛋白、
甲苯层、脂类物质层、沉淀层B．
甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂类物质层C．
脂类物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D．
甲苯层、脂类物质层、血红蛋白、沉淀层解析：选D
混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：
第1层为无色透明的甲苯层；第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第3层
是红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液；第4层是其他杂质的暗红色沉淀物，主要是红
细胞破碎物沉淀。10．PCR又称多
聚酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外
很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件
的一组是( )①稳定的缓冲液
环境 ②DNA模板 ③合成引物 ④四种脱氧核苷酸 ⑤DNA聚合酶⑥DNA解
旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧C．③④⑤⑥⑧D．①②③④⑤⑧解析：选D 体外DNA扩增(PCR技术)是模
拟生物细胞内DNA复制的条件，只是无
需解旋酶(可热变性)，也不需要基因工程的工具酶(限制性核酸内切酶)，但需要耐高温的DNA聚合酶。11．
某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的
肌肉。他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测
工作，其中正确的操作步骤及顺序是( )①降低
温度，检测处理后的杂合DNA双链②通过PCR技术扩增
巨型动物和大象的DNA③把巨型
动物的DNA导入大象的细胞中④在一定温度
条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A．②④①B．②④③① C．③④① D．②④③解析：选A PCR技术是分子生物
学发展史上的一个里程碑，它大大简化了基因克隆
的步骤，已广泛应用于生物学研究的各个领域。PCR反应通过变性、复性、延伸三个循环步骤
，使目标DNA片段呈指数扩增。因此，PCR系统是一个极其灵敏的信号放
大系统，能将极微弱甚至是单拷贝的基因信号检测出来。通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA，然后利用DNA分子在高温时解
螺旋的特点，将巨型动物和大象的DNA水浴共热，
再降低温度，检测处理后的杂合DNA双链。12．PCR技术是一
项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，如图表示合成过程。下列
说法错误的是( )A．
甲过程高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用第 3 页
的溶液分为4层
丙过程用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加C．
如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃～55 ℃～72 ℃”温度
循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%D．PCR中由
碱基错配引起的变异属于基因突变解析：选B
丙过程用到的酶是Taq DNA聚合酶，其特点是耐高温。二
、非选择题(共52分)13．(20分)CTAB法是一种从高
等真核生物细胞中制备基因组DNA(总DNA)的技术。CTAB能
跟核酸形成复合物，在高盐溶液(＞0.7 mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在，
当降低溶液中盐的浓度(＜0.3 mol/L的NaCl溶液)时，CTAB－核酸的复合物就会
因溶解度降低而沉淀，再用70%酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而
沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下：①在50 mL离
心管中加入20 mL的CTAB抽提缓冲液(主要成分是1.4 mol/L的NaCl、2%的CTAB)，于65 ℃水浴中
预热；②将20 g新鲜
的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离
心管中，于65 ℃水浴中保温30 min；③取出离
心管，冷却至室温，加入20 mL的氯仿，轻轻混匀20 min；④在
室温下以12 000 r/min的转速离心10～20 min；⑤将上
清液移入另一个离心管中，加入2/3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅
动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB－核酸的复合物沉淀；⑥将
沉淀移入另一个离心管中，加入70%酒精洗涤，重复洗涤1～2次；⑦吹
干酒精后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离
并在核酸紫外检测仪上观察。请回答
下列问题：(1)植
物基因组DNA(总DNA)的提取通常采用机械研磨的方法。常温下研磨时，植物
细胞匀浆中含有的多种酶会对DNA的提取产生不利影响。用液氮速冻，材料在研磨时
易破碎，同时还能__________________________________________________________________________________________________________________________。(2)实
验步骤③④的目的是________________________________________________________________________。(3)实
验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是______________________________________________________________________________________________________________
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