床内C．
等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口第 1 页
阶段质量检测(五)　DNA和蛋白质技术(A卷　学业水平达标)(满分：100分　时间：40分钟)一、选择题(每小题4分，共48分)1．在血红蛋白的提取和分离实验中，下列操作正确的是(　　)A．分离红细胞时需去除上层透明的黄色血浆B．红细胞释放出血红蛋白时只需加入蒸馏水C．分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D．洗脱时，待红色蛋白质下移即开始收集流出液解析：选A　分离红细胞时要及时除去血浆蛋白，红细胞释放血红蛋白时需要加入蒸馏水和甲苯。分离血细胞时，要短时低速离心，即一般为500 r/min，离心2 min，否则白细胞会一同沉淀，达不到分离效果。分离血红蛋白时要高速长时间离心，以2000 r/min的速度离心10 min。洗脱时待红色的蛋白质接近色谱柱底端时用试管收集流出液。2．下列属于PCR技术条件的是(　　)①单链的脱氧核苷酸序列引物　②目的基因所在的DNA片段　③脱氧核苷酸　④核糖核苷酸⑤DNA连接酶　⑥DNA聚合酶　⑦DNA限制性内切酶A．①②③⑤　　　　　B．①②③⑥C．①②③⑤⑦D．①②④⑤⑦解析：选B　PCR技术需要DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶。3．下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是(　　)A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少解析：选C　提取植物细胞中DNA时加入洗涤剂可瓦解植物细胞的细胞膜，利于DNA的释放，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度；含DNA的丝状物应先溶解在物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测，冷却后观察变成蓝色；菜花匀浆中含有DNA水解酶，常温下其活性较高，可催化DNA水解从而影响DNA的提取；用玻璃棒缓慢搅拌滤液不会使DNA分子断裂，即不会减少DNA的提取量。4．样品的加入和洗脱的操作错误的是(　　)A．加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶


吸管小心地将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面解析：选A　加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平
齐。5．关于DNA的实验，叙述正确的是(　　)A．用
兔的成熟红细胞可提取DNAB．PCR的每
个循环一般依次经过变性—延伸—复性三步C．DNA溶液与二苯胺试剂
混合，沸水浴后生成蓝色产物D．用甲基
绿对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色解析：选C　
兔属于哺乳动物，其成熟的红细胞中无细胞核，不适合作为提取DNA的
材料。PCR技术的每个循环一般依次经过变性—复性—延伸三步。DNA溶液在沸水浴条件下，
遇二苯胺呈蓝色。用甲基绿吡罗红混合染色剂对细胞进行染色时，细胞核(含DNA)呈绿
色，细胞质(含RNA)呈红色，仅用甲基绿无法对细胞质进行染色。6．下列关于有关实验的叙述正确的是(　　)A．
最先从凝胶色谱柱中分离出来的是相对分子质量较大的蛋白质分子B．
向初步纯化的DNA中加入二苯胺溶液，可直接观察到溶液呈蓝色C．加酶洗
衣粉中常用的酶制剂包括碱性脂肪酶、酸性蛋白酶等D．
装填凝胶色谱柱时，下端的尼龙管应先关闭后打开解析：选A　
采用凝胶色谱法分离蛋白质时，最先从凝胶色谱柱中分离出来的是相对
分子质量较大的蛋白质分子；用二苯胺鉴定DNA时需要水浴加热；加酶洗衣粉中常用的酶制剂是
碱性脂肪酶、碱性蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶；装填凝胶色谱柱时，下端的
尼龙管应始终处于开启状态。7．PCR过程
与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同，它们是(　　)①PCR过程
常用的引物是人工合成的DNA单链②PCR过程
不需要DNA聚合酶　③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反
应温度的控制来实现的　④PCR过程中，DNA不需要解旋，直接以双链DNA为模板
进行复制A．③④ B．①②C．①③D．②④解析：选C　PCR过程
与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同。第一，PCR过程
常用的引物是人工合成的DNA单链，其长度通常为20～30个脱氧核苷酸。第二，PCR过程
中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的。8．下列关于
现代生物技术应用的叙述，正确的有(　　)①在蛋白质的提取和分离实验中，凝胶色谱
法可将不同相对分子质量的蛋白质分离出
来　②在PCR中，引物的结构和长度决定DNA子链从5′端向3′端延伸　③在蛋白质的提取和分离实验中，透析的目的是去除样品中相
对分子质量较小的杂质　④在多聚酶链
式反应中，TaqDNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列A．1项 B．2项第 2 页
D.用


制时，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，和引物的结
构和长短没有关系，故②错误。9．DNA的粗提取与鉴定实验中有
三次过滤：(1)过
滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过
滤含黏稠物的0.14 mol/L NaCl溶液；(3)过
滤溶解有DNA的2 mol/L NaCl溶液。以上
三次过滤分别为了获得(　　)A．含核物质的滤液、
纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠
物、含DNA的滤液C．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠
物、纱布上的DNAD．含较
纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液 解析：选A　用蒸馏水
稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，
此时过滤得到含核物质的滤液。第二次过滤是因DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度
最小，DNA析出成丝状黏稠物，经过滤留在纱布上。第三次，是将第二次获得的
黏稠物溶解在2 mol/L的NaCl溶液后，过滤除去杂质获得含DNA的滤液。10．聚合酶链
式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温
复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅
速扩增，其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术的叙述，不正确的是(　　)A．PCR技术是在实验
室中以少量DNA制备大量DNA的技术B．
反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C．PCR技术中以核糖核苷酸为
原料，以指数方式扩增D．应用PCR技术与
探针杂交技术可以检测基因突变解析：选C　PCR的
原理就是DNA的复制，原料应该是脱氧核糖核苷酸而不是核糖核苷酸。11．下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验的叙述，正确的是(　　)A．前
者选择鸡血细胞作为材料较好，后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料
较好B．样品
预处理时，前者静置1 d处理除去上清液；后者需要加入清水，反复低速短时间离心洗涤，
至上清液无黄色C．在DNA粗提取实验中，
往2 mol/L 氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应该
缓慢加入，直到出现黏稠物为止D．洗涤红细胞的目的是去除血浆中的
葡萄糖、无机盐等解析：选A　
鸡血细胞有细胞核，适于提取DNA；哺乳动物成熟红细胞无细胞核和
众多细胞器，适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中，洗涤红细胞时，不能加
清水，应该加入生理盐水，否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合，加大提取难第 3 页
C．3项D．4项解析：选C　DNA复


析出时，加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白，以利于血红蛋白的分离和
纯化。12.已知某
样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子
大小、电荷的性质和数量情况如右图所示。下列有关蛋白质分离的叙述正确的是(　　)A．将样品
装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内，则分子
丙也保留在袋内B．
若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快C．
若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存
在于沉淀中D．
若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形
成的电泳带相距最远解析：选A　透析
袋可使小分子物质透过，而大分子物质不能透过，丙的相对分子质量
大于乙，若乙留在袋内，则丙一定也留在袋内，故A项正确。B选项中甲相对分子质量
最小，在凝胶色谱柱中移动的速度应最慢。C选项戊沉淀，甲不一定沉淀。D选项利用分子
大小的差异将其分离，故相距最远的应为丙和甲。二、
非选择题(共52分)13．(18分)下
图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图
中实验材料A可以是________等，研磨前加入的B应该是________。(2)通过
上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是____________________，再
过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是________________________________________________________________________。(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定
杂质的DNA丝状物分别放入体积
为2 mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如下表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液________。1B液中搅拌
研磨后过滤滤液E22 mol/L的NaCl溶液中搅拌后
过滤滤液F30.14 mol/L的NaCl溶液中搅拌后
过滤滤液G4冷却的95%的
酒精溶�